另类 专区 欧美 制服丨狠狠色噜噜狠狠狠狠色综合久丨亚洲综合无码无在线观看丨国产色在线 | 日韩丨猫咪免费人成网站在线观看

實(shí)驗(yàn)步驟

1、首先將上海凈信的組織研磨機(jī)上的制冷模塊預(yù)先置于適當(dāng)?shù)臏囟认?，使用時取出安裝好。將研磨珠去RNA酶處理。

2、隨機(jī)抽取小鼠的尾巴，把樣本剪成盡可能小段，置于無RNA酶的離心管中（選擇耐液氮冷凍管子），同時加入幾顆研磨珠。

3、放置于液氮中一起浸泡幾分鐘，取出放置于預(yù)冷模塊中，在全自動樣品研磨儀上選擇合適的研磨時間和研磨頻率。（該步驟可以根據(jù)研磨的細(xì)微程度要求可以再重復(fù)一遍）

4、把研磨好的樣本加入的PBS和RNAiso Plus（此處選擇PBS，可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要加入其他提取液，如TRIzol等），繼續(xù)置于研磨機(jī)上選擇合適的研磨時間和研磨頻率。樣本將處于糊狀。（其他提取試劑有可能會出現(xiàn)泡沫，不影響實(shí)驗(yàn)）

5、取出研磨管，放入冷凍離心機(jī)中，選擇適當(dāng)?shù)臏囟冗M(jìn)行離心幾分鐘。

6、小心吸取上清液至新的離心管中，蓋上管蓋，在室溫上孵育十幾分種，使樣品充分裂解至勻漿液較透明，如果仍有少量顆粒屬于正常情況，不影響RNA提取質(zhì)量和得率。

7、在離心管中加入氯仿，蓋緊管蓋，振蕩混勻并將其在冰上孵育幾分種，選擇適當(dāng)?shù)臏囟冗M(jìn)行離心幾分鐘。離心后混合物分層：上清層，中間層，下層；RNA存在于上清層中。

8、將上清層小心轉(zhuǎn)移到一干凈的離心管中，加入等體積冰浴的異丙醇，顛倒振蕩混勻，將混合的樣品在適當(dāng)?shù)臏囟葪l件下，孵育幾分種，選擇適當(dāng)?shù)臏囟冗M(jìn)行離心幾分鐘。RNA沉淀通常形成片狀沉淀附著于管壁或管底。

小心棄去上清，用冰浴的乙醇洗滌RNA沉淀一次，顛倒洗滌離心管管壁，并旋渦振蕩樣品，盡可能讓沉懸浮，選擇適當(dāng)?shù)臏囟冗M(jìn)行離心幾分鐘，再次去除上清，晾干沉淀。

10、操作的最后，在陰涼處適度干燥RNA沉淀（避免過分干燥，那樣會降底它的可溶性）。

11、用適量的無RNA酶水或TE溶液來溶解RNA。抽提好的RNA，保存于適當(dāng)?shù)臏囟认隆?/p>